人胚腎細(xì)胞293T：生物醫(yī)學(xué)研究的多功能工具細(xì)胞

　　在基因工程、病毒學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)等生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域，一株穩(wěn)定、高效的細(xì)胞模型是推動(dòng)實(shí)驗(yàn)進(jìn)展的核心基礎(chǔ)。人胚腎細(xì)胞293T憑借易培養(yǎng)、轉(zhuǎn)染效率高、可穩(wěn)定表達(dá)外源基因等優(yōu)勢(shì)，成為全球?qū)嶒?yàn)室廣泛應(yīng)用的“明星細(xì)胞系”，為重組蛋白制備、病毒包裝、基因功能研究等提供了的實(shí)驗(yàn)載體。?

　　從生物學(xué)特性來(lái)看，293T細(xì)胞呈上皮樣形態(tài)，貼壁生長(zhǎng)，在含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基、37℃、5%CO?的培養(yǎng)條件下生長(zhǎng)旺盛，倍增時(shí)間約24-30小時(shí)。其顯著的優(yōu)勢(shì)是轉(zhuǎn)染效率高，無(wú)論是脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染、電穿孔轉(zhuǎn)染還是病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染，效率均可達(dá)到70%-90%，遠(yuǎn)高于普通細(xì)胞系，尤其適合需要高表達(dá)外源蛋白的實(shí)驗(yàn)。此外，293T細(xì)胞對(duì)多種病毒具有良好的相容性，可支持慢病毒、腺病毒、腺相關(guān)病毒等的包裝與擴(kuò)增，且自身分泌的內(nèi)源性病毒顆粒少，保障了實(shí)驗(yàn)的安全性。?
 

　　在科研應(yīng)用中，293T細(xì)胞的“多功能性”得到充分體現(xiàn)。重組蛋白制備領(lǐng)域，它是生產(chǎn)單克隆抗體、細(xì)胞因子、酶等重組蛋白的理想宿主：通過(guò)轉(zhuǎn)染攜帶目標(biāo)蛋白基因的表達(dá)質(zhì)粒，293T細(xì)胞可高效合成并分泌重組蛋白，后續(xù)經(jīng)純化即可獲得高純度產(chǎn)物。病毒學(xué)研究領(lǐng)域，293T細(xì)胞是病毒包裝的“黃金細(xì)胞”：在基因治療研究中，通過(guò)共轉(zhuǎn)染病毒包裝質(zhì)粒與目的基因質(zhì)粒，可在293T細(xì)胞內(nèi)組裝成具有感染能力的重組病毒，再用于感染靶細(xì)胞實(shí)現(xiàn)基因遞送；在病毒復(fù)制機(jī)制研究中，可通過(guò)轉(zhuǎn)染病毒基因片段，觀察病毒蛋白的相互作用及病毒顆粒的組裝過(guò)程。基因功能研究領(lǐng)域，借助CRISPR/Cas9技術(shù)對(duì)293T細(xì)胞進(jìn)行基因敲除或敲入，構(gòu)建基因編輯細(xì)胞模型，可直觀研究特定基因在細(xì)胞增殖、凋亡、信號(hào)通路中的功能。例如，通過(guò)敲除293T細(xì)胞中的p53基因，研究其對(duì)細(xì)胞周期調(diào)控的影響。?

　　盡管293T細(xì)胞應(yīng)用廣泛，但也存在一定局限性：作為胚胎腎來(lái)源細(xì)胞，其生物學(xué)特性與腫瘤細(xì)胞或特定組織細(xì)胞存在差異，不能替代原代細(xì)胞或組織特異性細(xì)胞系進(jìn)行研究；長(zhǎng)期傳代可能導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)遺傳漂變，影響實(shí)驗(yàn)重復(fù)性。因此，實(shí)驗(yàn)中需定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行身份鑒定和支原體檢測(cè)，確保細(xì)胞純度與穩(wěn)定性。?