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技術(shù)文章
STR(ShortTandemRepeat,短串聯(lián)重復(fù)序列)鑒定技術(shù)是一種基于DNA分子多態(tài)性的遺傳分析方法,通過檢測特定基因座上短串聯(lián)重復(fù)序列的重復(fù)次數(shù)差異,實(shí)現(xiàn)個(gè)體或細(xì)胞系的精準(zhǔn)識(shí)別。其核心原理在于:STR序列由2-6個(gè)堿基組成的核心單元串聯(lián)重復(fù),不同個(gè)體或細(xì)胞系在同一基因座的重復(fù)次數(shù)存在差異,形成獨(dú)特的“遺傳指紋”。技術(shù)流程包括DNA提取、PCR擴(kuò)增特定STR位點(diǎn)、電泳分離擴(kuò)增產(chǎn)物,最終通過條帶位置確定重復(fù)次數(shù),生成分型數(shù)據(jù)。
在人肝癌細(xì)胞研究中,STR鑒定技術(shù)具有雙重價(jià)值:
細(xì)胞系身份驗(yàn)證:肝癌細(xì)胞系(如MHCC97-H、HCCLM3)在傳代過程中易發(fā)生交叉污染或標(biāo)記錯(cuò)誤。通過檢測21個(gè)人類STR位點(diǎn)(如TH01、D5S818等),可與ATCC等數(shù)據(jù)庫比對,確認(rèn)細(xì)胞系來源及純度。例如,HCCLM3細(xì)胞系經(jīng)STR鑒定后,可排除HeLa等常見污染細(xì)胞,確保實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)確性。
遺傳穩(wěn)定性監(jiān)測:肝癌細(xì)胞系在長期培養(yǎng)中可能發(fā)生遺傳漂變。定期STR檢測可追蹤特定基因座重復(fù)次數(shù)變化,判斷細(xì)胞是否保持原始遺傳特征。例如,MHCC97-H細(xì)胞系通過STR分型確認(rèn)其高轉(zhuǎn)移性亞群(SP細(xì)胞)的遺傳穩(wěn)定性,為肝癌轉(zhuǎn)移機(jī)制研究提供可靠模型。
此外,STR技術(shù)還應(yīng)用于肝癌細(xì)胞治療產(chǎn)品的質(zhì)量控制。在CAR-T細(xì)胞治療中,通過STR鑒定可驗(yàn)證供體細(xì)胞與治療產(chǎn)品的遺傳一致性,避免免疫排斥風(fēng)險(xiǎn)。其高靈敏度(聯(lián)合16個(gè)位點(diǎn)識(shí)別率達(dá)99.9999999998%)與標(biāo)準(zhǔn)化流程,使其成為肝癌基礎(chǔ)研究、藥物篩選及細(xì)胞治療領(lǐng)域的工具。