小鼠小膠質(zhì)BV2原代培養(yǎng)的主要試劑是什么？

　　組成中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細(xì)胞主要是神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，包括大膠質(zhì)細(xì)胞（星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞）和小鼠小膠質(zhì)BV2。小膠質(zhì)細(xì)胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的主要免疫細(xì)胞，可呈遞抗原，分泌多種細(xì)胞因子，吞噬細(xì)胞病原體和壞死組織。它們被認(rèn)為是大腦中的單核巨噬細(xì)胞，由于小膠質(zhì)細(xì)胞在顱內(nèi)免疫反應(yīng)中的重要作用，小膠質(zhì)細(xì)胞的研究已成為一個熱點(diǎn)。

　　小鼠小膠質(zhì)BV2的體外培養(yǎng)是研究小膠質(zhì)細(xì)胞功能的重要途徑。在這里，我們將整理小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞的原代培養(yǎng)。那么主要試劑是什么？
 

　　1、PBS：PBS粉末，向每個袋中加入ddH2O，使體積達(dá)到1000ml，將pH值調(diào)節(jié)至7.2，高壓滅菌并滅菌。

　　2、0.25％胰蛋白酶消化液：使用時濃度為0.25％，含有0.02％EDTA。準(zhǔn)備時，將250mg胰蛋白酶和20mgEDTA溶解在100mLPBS溶液中，并在無菌手術(shù)臺上使用0.22um一次性溶液，通過過濾器過濾，取50ml等分試樣，并保存在4°C下。

　　3、接種物的制備：先用DMEM-F12進(jìn)行90％基礎(chǔ)培養(yǎng)，然后再用10％胎牛血清，后用1％體積分?jǐn)?shù)的雙抗體原液（青霉素+鏈霉素）制成青霉素和鏈霉素元素分別為100U/mL和100U/mL，分別儲存在4℃的冰箱中。

　　4、抗生素：將青霉素（800,000U）和鏈霉素（1,000,000U）溶解在無菌手術(shù)臺中高壓滅菌的雙蒸餾水中。分別加入4ml無菌水/青霉素和5ml無菌水/鏈霉素，分別制成200,000u/ml等分試樣，在-20°C的冰箱中儲存，并在使用前在4°C融化。注意避免反復(fù)冷凍和解凍，并使培養(yǎng)基的終濃度為100u/ml。

　　5、0.01％L-聚賴氨酸溶液的制備：稱取10mgL-聚賴氨酸溶液，將其溶于100ml無菌去離子水中，過濾并用0.22μm正壓過濾器分裝，在-20℃下儲存。

　　6、0.4％錐蟲藍(lán)溶液的制備。