人胚腎細(xì)胞293T接收后要做這些處理

　　人胚腎細(xì)胞293T是一種廣泛使用的細(xì)胞系，也被稱為HEK 293T或293 cells。它最初由Frank Graham和Alex van der Eb于1977年在荷蘭萊頓大學(xué)建立。

　　這種細(xì)胞起源于人類的胚胎腎小管上皮細(xì)胞，因此能夠表達(dá)許多與腎功能相關(guān)的基因和蛋白質(zhì)。293T細(xì)胞株可以通過無血清培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)以及有限制性酶消化等方法進(jìn)行傳代。
 

　　一、人胚腎細(xì)胞293T接收后要做這些處理：

　　1、收到細(xì)胞后，請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

　　2、在顯微鏡下確認(rèn)人胚腎細(xì)胞293T生長狀態(tài)時，在低倍鏡（4或5X物鏡)下進(jìn)行，能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度。看細(xì)胞的形態(tài)請在10X和20×物鏡下，同時給剛收到的細(xì)胞拍照，（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為細(xì)胞需要售后時提供收到細(xì)胞時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

　　3、觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h。

　　4、貼壁細(xì)胞：在運(yùn)輸過程中貼壁細(xì)胞會有脫落的現(xiàn)象，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落或者脫落后抱團(tuán)生長，可將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和未貼壁細(xì)胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基的原培養(yǎng)瓶中（或新的培養(yǎng)瓶中）。

　　5、懸浮細(xì)胞：T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細(xì)胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中（加入按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基）。

　　6、備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)人胚腎細(xì)胞293T，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后一次傳代建議1：2傳代。
 

　　二、具有以下特點(diǎn)：

　　1、高轉(zhuǎn)染效率：由于其雙倍體狀態(tài)，在轉(zhuǎn)染時比單倍體細(xì) 胞更容易接受外源DNA并表達(dá)。

　　2、容易獲取且穩(wěn)定：相較其他已知能夠支持多次分裂生長癌變標(biāo)準(zhǔn)株（如HeLa），293T不能連續(xù)無限度地 進(jìn)行傳代，所以不存在惡性增殖的風(fēng)險 ，但其仍然保持了高 度穩(wěn)定性。

　　3、可應(yīng)用于研究不同類型病毒感染機(jī)理：由于其廣泛應(yīng)用 于原代細(xì) 胞 文化中作為對照組，而新出現(xiàn)的病毒往往沒有可靠 的細(xì)胞系可以進(jìn)行繁殖，因此293T被用于在人類細(xì) 胞中表達(dá)和復(fù) 制不同類型的病毒。

　　4、適合制備慢病毒載體：由于其能夠高效地產(chǎn)生包含重組基 因的慢 病 毒，所以被廣泛應(yīng)用于基因傳遞工具之一。